CZ | EN

Funkční studie transkripčního faktoru WT1 a jeho přirozených mutantů

Functional study of WT1 transcription factor and its naturally occurring mutants

Funkční studie transkripčního faktoru WT1 a jeho přirozených mutantů

Functional study of WT1 transcription factor and its naturally occurring mutants

ANOTACE

Gen kódující WT1 byl původně identifikován díky jeho roli ve vývoji Wilmsova tumoru a brzy bylo zjištěno, že mutace v tomto genu vedou k závažným onemocněním ledvin (glomerulární nefropathie). WT1 má několik funkcí od regulace transkripce až po RNA procesování. Regulace transkripce je umožněna sérií motivů zinkových prstů, které se nachází v C-terminální oblasti proteinu a umožňují WT1 specificky vázat DNA. A právě v této oblasti se vyskytují mutace projevující se během vývoje urogenitálního systému. Cílem této bakalářské práce je připravit vektory pro expresi C-terminální domény WT1, příslušné proteiny purifikovat a analyzovat interakci se specifickým úsekem DNA pomocí fluorescenční anizotropie.

ANNOTATION

The gene encoding WT1 was originally identified due to its role in the development of Wilms' tumor and it was soon discovered that mutations in this gene lead to serious kidney disease (glomerular nephropathies). WT1 has several functions from transcription control to RNA processing. Regulation of transcription is enabled by several zinc finger motifs located in the C-terminal region of the protein that mediate binding of WT1 to its target DNA. The mutations within the zinc fingers become evident during the development of the urogenital system. The aim of this bachelor thesis is to prepare vectors for expression of the C-terminal domain of WT1, to purify this protein and to analyze interaction with a specific DNA segment using fluorescence anisotropy.