ANOTACE

Dědičná sférocytóza je způsobena mutací v některém z proteinů tvořících cytoskelet červených krvinek, který zajišťuje jejich správný tvar a pružnost. Nedostatečná exprese nebo chybná funkce cytoskeletálních proteinů je příčinou ztráty bikonkávního tvaru krvinek a snížení jejich osmotické rezistence. Zvýšená hemolýza a předčasné odstraňování erytrocytů z krevního oběhu slezinou pak často vedou k anémii. Vyšetření pro detailní určení příčiny anémie zatím v České republice není k dispozici a v současné době je zaváděno v Ústavu hematologie a krevní transfuze. Hlavním cílem diplomové práce je optimalizovat metody umožňující zpřesnění diagnostiky dědičné sférocytózy, zejména separaci proteinů erytrocytárního cytoskeletu pomocí gelové elektroforézy a barvení cytoskeletálních proteinů eosin-maleimidem na průtokovém cytometru. V rámci práce budou pak pomocí těchto metod vyšetřeny vzorky krve zdravých dárců a pacientů s prokázanou nebo suspektní dědičnou sférocytózou. Získané výsledky budou korelovány s výsledky dalších laboratorních vyšetření. Mezi prováděná vyšetření bude zařazena i detekce apoptotických buněk pomocí barvení fluorescenčně značeným Annexinem V, aby byla vyjasněna sporná otázka zvýšené indukce apoptózy u dědičné sférocytózy.